SnapGene
星级

4.8

SnapGene

更新时间:2021-02-14 当前版本:V5.6 大小:59.9MB
软件类别:教育学习 软件平台:Win7/Win10/Win8/Android/IOS
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应用介绍

SnapGene是一款功能强大且专业权威的分子生物学的软件,它模拟了Clontech的In-Fusion克隆技术,只需选择您想要融合的DNA片段,即可设计引物,是创建无缝基因融合的一种非常通用的方法。并且软件能够非常直观的注释分析和DNA图谱,用于创建和共享丰富的注释文件,帮助我们准确清晰地为分子生物学绘制相关图形。除此之外,软件界面友好,使用简单,记录全面,融合了DNAstar和DNAman等软件的特点,用户可以直接将实验的每个DNA构建体以电子格式记录下来,轻松的帮助您完成所需要的工作。而且还还简化了吉布森装配反应的计划,并自动化了底漆设计,通过PCR扩增待连接的DNA片段以产生重叠末端。可帮助用户快速计划,可视化和记录您的日常分子生物学程序,并为大家提供更安全快速的方法,现在每个DNA构建体都可以用丰富的电子格式记录,它节省了大量的时间和金钱,并且方便使用者快速发现问题,制作更加优化的决策和方案。此次为你带来的是SnapGene破解版,此版本内置破解文件可以有效激活破解软件,从容让用户可以免费体验人全部内容,小编亲测好用。其下文还拥有详细的安装破解教程,有需要的小伙伴欢迎下载收藏啦。

安装教程

1、在本站下载并解压,得到SnapGene 5.0.5.exe安装程序和crack破解文件夹

2、双击SnapGene 5.0.5.exe运行,选择安装路径,点击next

3、许可协议,点击i agree

4、现在安装附件,用户可以根据需求安装;

5、安装完成,点击finish,先不要打开软件;

6、将crack中的ActivationCrack.exe复制到安装目录中;
默认路径:C:Program Files (x86)SnapGene

7、至此SnapGene破解完成,打开程序即可使用

功能特色

1、In-Fusion 克隆
Clontech的In-Fusion克隆技术是创建无缝基因融合的一种非常通用的方法。SnapGene是第一个模拟此程序的软件。只需选择您想要融合的DNA片段,SnapGene即可设计引物。
2、GibsonAssembly
许多研究人员转向吉布森大会,不使用限制性内切酶将片段插入质粒。通过PCR扩增待连接的DNA片段以产生重叠末端。SnapGene简化了吉布森装配反应的计划,并自动化了底漆设计。
3、限制性克隆
SnapGene独特的限制克隆界面以干净的布局显示您需要的信息。规划克隆程序从未如此简单。如果你已经知道你想要做什么,克隆模拟只需要几秒钟。如果克隆程序存在设计缺陷,则可以在模拟过程中捕获并纠正错误。
4、PCR&诱变 
设计引物后,可用它们来模拟常规PCR,重叠延伸PCR或诱变。产生的DNA序列文件立即可用于进一步操作。与限制性克隆界面一样,针对引物的界面以直观的方式显示关键信息。
5、自动文档 
SnapGene最令人惊奇的地方在于它会自动记录克隆项目中的步骤。每次编辑序列或模拟克隆或PCR或诱变时,该程序都会自动记录在图形历史记录中。在模拟DNA构建体的创建之后,您可以将历史记录用作实验方案。嵌入在最终文件中的是所有的祖先构造,其中的每一个都可以作为单独的文件复活。

使用教程

限制性克隆的技巧
对于许多应用,常规限制性克隆仍然是最好的方法。一些简单的技巧将有助于确保您的克隆顺利进行。
1、一般技巧
首先,在程序的每一步都要小心。从长远来看,这种方法可以节省时间。
确保DNA非常干净。当制备载体或切除待插入的片段时,从约2μg的DNA开始。
每次酶促反应后,用旋转柱纯化DNA。在40-45μl的10mM Tris(pH8.5)中洗脱DNA,然后进行下一步反应。(在用凝胶纯化DNA片段之前不需要使用旋转柱。)
为了最大限度地提高效率,请尽量减少程序中的步骤数。例如,将钝端片段克隆到钝性载体位点(例如SmaI位点)比将其用Klenow或T4 DNA聚合酶钝化的位点更好。
如有疑问,用凝胶纯化DNA片段。更清洁的起始材料将产生更好的结果。
2、准备矢量
限制性克隆最常见的问题是在手术后恢复起始载体。该问题有两个原因:载体的不完全消化,以及切割载体与其自身的重新连接。下面描述的技巧将最大限度地减少这些影响。
确保载体的消化完成。使用过量的限制酶(约20 U,2μgDNA),消化约4小时。如果载体需要用两种具有不同最佳反应缓冲液的酶切割,则依次进行消化,并在其间进行旋转柱纯化。
消化载体(并且如果合适的话钝化),用磷酸酶处理:在37℃下1小时处于5'突出端,或者如果DNA具有任何平末端或3'突出端则在50℃处理1小时。
用旋转柱除去磷酸酶。通常不需要对载体进行凝胶纯化,因为磷酸酶处理会使产生的任何额外DNA片段失活。
3、使用载体,确保消化和磷酸酶反应完成。彻底和反复地涡旋混合物,并且不允许任何液滴逃脱酶处理。在涡旋后短暂旋转以确保管侧没有留下液滴是个好主意。
准备插入的片段
为了制备插入的片段,不完全消化不是一个严重的问题,因为片段的部分回收是可接受的。您可以使用相对较短的消化时间,对于双重消化,您可以使用对一种或两种酶来说不是最理想的反应缓冲液。
用凝胶纯化插入的片段。除去除不需要的或不完全消化的DNA外,该方法还可去除酶和小分子。当用透照仪观察DNA条带时,不要使用312nm或更低的短波紫外线,因为DNA会受到严重损害。请改用360-365 nm紫外灯。
如果通过PCR产生插入的片段,则在进行任何限制性消化之前用凝胶或旋转柱纯化。如果您计划将平末端PCR片段(用聚合酶如Pfu产生)克隆到磷酸酶处理的载体中,请确保您的PCR引物含有5'-磷酸。
结扎和转化
使用磷酸酶处理的载体,进行对照连接,其中省略插入的片段。该对照连接应该产生非常少的转化体,因为只有环状DNA分子有效地转化大肠杆菌,并且在不与磷酸化片段连接的情况下不能发生载体的再环化。
如果DNA仅有粘性末端,则在室温下连接约1小时。如果DNA具有任何平端,则在室温下连接约4小时并使用高浓度T4连接酶。
微量制作和诊断摘要
如果您使用插入的片段获得了比用于对照连接的结扎更多的转化体,那么您的克隆几乎肯定会起作用,并且您通常只能制作3-4个小量制备物。
在执行小量制备的诊断限制摘要时,始终包括起始向量作为参考标准。
       

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